摘要：電子順磁共振(EPR)波譜聯(lián)用外源性自旋探針技術(shù)是測(cè)量體內(nèi)外pH的有效手段.有研究表明,單磷酸取代三苯甲基(p1TAM)自由基是目前用于檢測(cè)pH的最理想的EPR探針.然而,這類探針的合成產(chǎn)率低、易受蛋白影響,極大限制了其生物應(yīng)用.針對(duì)上述問題,本文提出了高效合成p1TAM自由基的方法,使其總產(chǎn)率從文獻(xiàn)報(bào)道的1.6%提高到了25%;同時(shí)采用PEG修飾的方法避免了白蛋白(BSA)對(duì)其產(chǎn)生的干擾.進(jìn)一步氘代實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí):非氘代PEG化(p1TAM-H)衍生物(POP)雖與氘代PEG化(p1TAM-D)衍生物(dPOP)具有相似的pH敏感性(其pKa分別為6.80和6.79),但POP的EPR譜圖較為復(fù)雜,而dPOP無論在低pH還是在高pH條件下均具有簡(jiǎn)單的EPR雙峰信號(hào);而且,dPOP具有比POP和p1TAM-H更好的檢測(cè)靈敏性;此外,dPOP還具有較好的生物穩(wěn)定性和氧氣敏感性.因此,dPOP能夠用來同時(shí)檢測(cè)pH和氧氣,有望在生物醫(yī)學(xué)方面得到更好的應(yīng)用.