摘要：目的建立子宮內(nèi)膜異位癥(內(nèi)異癥)患者異位病灶來源子宮內(nèi)膜干細胞(En SCs)的分離培養(yǎng)及鑒定方法,并對所分離細胞的生物學(xué)特性進行檢測,為研究En SCs在內(nèi)異癥發(fā)病機制中的潛在作用提供支持。方法收集臨床內(nèi)異癥患者異位病灶內(nèi)膜組織樣本,機械剪碎后Ⅰ型膠原酶消化,分離獲得異位En SCs,常規(guī)培養(yǎng)傳代(n=10);免疫熒光檢測細胞波形蛋白(vimentin)的表達(n=3);MTT法檢測細胞增殖活性(n=5);成脂成骨誘導(dǎo)檢測細胞多向分化潛能(n=3),流式細胞儀檢測細胞表面標(biāo)志物(n=3);蛋白芯片檢測細胞條件培養(yǎng)基中促血管再生因子及相關(guān)炎癥因子的分泌(n=6),同時檢測細胞表面相關(guān)黏附分子的表達(n=7)。結(jié)果成功從異位病灶中分離獲得異位En SCs,所分離細胞強陽性表達骨架蛋白vimentin,且細胞陽性表達間充質(zhì)干細胞表面標(biāo)志物CD29、CD73、CD90及CD105,陰性表達造血干細胞表面標(biāo)志物CD34和CD45;經(jīng)成脂誘導(dǎo)分化后油紅O染色可見明顯脂滴,成骨誘導(dǎo)分化后茜素紅染色可見明顯鈣結(jié)節(jié);蛋白芯片檢測結(jié)果表明,異位En SCs能夠分泌高濃度的促血管再生因子血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、血管緊張素(ANG)及血小板衍生生長因子(PDGF)-AA,以及與促血管再生密切相關(guān)的炎癥因子白細胞介素(IL)-6、IL-8和單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1),且細胞表面高表達活化白細胞黏附分子(ACLAM)和細胞間黏附分子-1(ICAM-1)。結(jié)論本研究成功建立內(nèi)異癥患者異位病灶來源En SCs的分離培養(yǎng)及鑒定方法;對其活性因子分泌的研究表明,異位En SCs具有明顯的促血管再生作用。上述實驗結(jié)果肯定了內(nèi)異癥患者異位病灶中干細胞的存在,在支持內(nèi)異癥發(fā)病機制中"干細胞學(xué)說"的同時,為進一步圍繞異位En SCs開發(fā)潛在的內(nèi)異癥治療靶點提供可能。